基因干擾
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RNA干擾(RNA interference,RNAi)是正常生物體內抑制特定基因表達的一種現象,當細胞中導入與內源性mRNA編碼區同源的雙鏈RNA(double stranded RNA,dsRNA)時,該mRNA發生降解而導致基因表達沉默的現象。外源dsRNA 進入細胞后產生的小分子干擾RNA(small interfering RNA, siRNA)的反義鏈和多種核酸酶形成了沉默復合物(RNA-induced silencing complex,RISC),RISC具有結合和切割mRNA的作用而介導RNA干擾的過程。
載體選擇(部分)
病毒載體的選擇,根據實驗的需求參考慢病毒、腺相關病毒、腺病毒逆轉錄病毒等。
載體類別 | 載體元件 |
慢病毒干擾 | pCLenti-U6-shRNA-CMV-Puro-WPRE |
pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-WPRE | |
pCLenti-U6-shRNA-CMV-EGFP-F2A-Puro-WPRE | |
GL408 pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-Puro-WPRE | |
pCLenti-U6-shRNA-CMV-mCherry-F2A-BSR-WPRE | |
腺病毒干擾 | pADV-U6-shRNA-CMV-EGFP |
pADV-U6-shRNA-CMV-mCherry | |
腺相關病毒干擾 | pAAV-CBG-EGFP-3xFLAG-WPRE-H1-shRNA |
pAAV-CBG-mCherry-3xFLAG-WPRE-H1-shRNA | |
pAAV-U6-shRNA/spgRNA v2.0-CMV-EGFP-WPRE |
服務簡介
根據客戶提供的目的基因,針對該基因設計3個siRNA靶點,再將這些靶點構建到相關載體,針對病毒載體,包裝生產的病毒顆粒可以直接用于感染細胞或者動物實驗。
病毒載體服務流程
物種及目的基因名稱 目的基因名稱,種屬等信息 目的基因名稱,種屬等信息
病毒載體要求與選擇 載體需求(抗性、熒光、便簽等) 載體需求(抗性、熒光、便簽等)
其它特殊需求 目的細胞等信息 目的細胞等信息
其它特殊需求 其它特殊需求 其它特殊需求